分子印迹技术

将各种生物大分子从凝胶转移到一种固定基质上的过程称为印迹技术(blotting)。

• 中文名 分子印迹技术
• 时间 1975年
• 提出者 Southern
• 解释 将大分子从凝胶转移到固定基质

基本简介

　　将各种生物大分子从凝胶转移到一种固定基质上的过程称为印迹技术(blotting)。

基本概况

派乱推　　Southern在1975年首先提出了分子并印迹的概念。他将琼来自脂糖凝胶电泳分离的 DNA片讲段在凝胶中进行变性使其成为单缺础刑春断作链，然后将一张硝酸纤维素(nitrocellulose， NC)膜放在凝胶上，上面放上吸水纸巾，利用毛细管作用原理使凝胶中的DNA片段转移到 NC膜上，使之成为固相化分子。载有DNA单链分子的 NC膜就可以在军云杂交液与另一种带有标记的 DNA360百科或RNA分子(即探针)进行杂交，具有互补序列的总住正体RNA或DNA结合到存在于真委东示配巴造散七NC膜的 DNA分子上，经放射自显影或其他检测技术乙效已调系志代久便深谓就可以显现出杂交分子的区带。由于这种技术类似于用吸墨纸就似星四多府思吸收纸张上的墨迹，因此称为"blotting"，译为"印迹技术"。

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分子印迹技术

　　生物大分子印迹技术发展极为迅速，己广泛用于 DNA、RNA、蛋白质的检测。通常人们将DNA印迹技术称为Southern blotting，将RNA印迹全火再值江侵知白技术称为Northern blotting，将蛋白质印迹技术称为Western blotting，将不经凝胶的印迹技术称为斑点印迹(Dot blo条县众难tting)。

基本原理

利用表面来自分子印迹技术选择性检测兽药残留物

　　当模板分子(印迹分子)与聚合物单体接触时会形成多重作用点，通过聚合过程这种360百科作用就会被记忆下来，当模板分子除去后，聚合物中就形成了与模板分子空间构型相匹配的具有多重作用点的空穴，这样的空穴将对模板分子及其类似物具有选择识别特性。

基本步骤

　　1.在一定溶剂(也称致孔剂)中，模板分子与功能单体依靠官能团之间的共价或非共价作用形成主客体配合物;

　　2.加入交联剂，通过引套三发剂、光或热等引发单体聚合，使主客体配合物与交联剂通过自由基共聚合在模板分子周围形成高联的刚性聚合物;

　　3.将聚合物中的印迹分子洗脱或解离出来。

　仍商书测开片山用短视　这样在聚合物中便留下了与模板分子大小和形状相匹配的立体孔穴，同时孔穴中包含了精确排列的与模板分子官能团互补的由功能单体提供的甲缩既益教响负兴语功能基团，如果构建合适，这种分子印迹聚合物就象锁一样对此钥匙具有选择性。这便赋予该聚合物特异的"记忆"功能，即类似生物自然的识别系统，这样的空穴将对模板分子及其类似物具有选择识别特性。

分类

　　目前,根据模板分子和功能单体之间形成多重作用点方式的不同，分子印迹技术可以分为两类:

　　1.共价键法(预略氧几内管多组装方式)

　　聚合前印迹分子与功能单体反应形成硼酸酷、西夫碱、亚胺、缩醛等衍生物，通过与交联剂共聚生成高分子聚合物，用水解等化学方法除去印迹分子即得到共价结合型分子印迹聚合物。

　　2.非共价键法(自组装方式)

　　非共价键法是制备分子印迹聚合物最有效且最常用的方法。这些非共价键包括静电引力(离子交川术查担同进缺换)、氢键、金属鳌合、电荷转移、疏水作用以及范德华力等。其中最重要严的类型是离子作用，其次是氢键风作用。

特点

　　1.预定性，即它可以根据不同的目的制备不同的印迹聚合物MIPs，以满足各种不同的需要。

　　2.识别性，即印迹聚合物MIPS是按照模板分子定做的，可专一地识别印迹分子。

　　3.实用性，即它可以与天然的生物分子识别系统如酶与底物、抗原与抗体、受体与激素相比拟，但由于它是由化学合成的方法制备的，因此又有天然分子识别系统所不具备的抗恶劣环境的能力，从而表现出高度的稳定性和长的使用寿命。

应用举例

　　1.用于化学仿生传感器

　　由于MIPS对于印迹分子的高选择性，故可以作为仿生传感器的分子识别元件;这种分子识别作用可以通过信号转化器(压电晶体、电极、电阻等)输出，然后通过各种电、热、光等手段转换成可测信号，可定量分析各种小分子有机化合物。

　　2.色谱分离

　　MIPS最广泛的应用之一是利用其特异的识别功能去分离混合物，近年来，引人瞩目的立体、特殊识别位选择性分离已经完成。其适用的印迹分子范围广，无论是小修善根分子(如氨基酸、药品和碳氢化合物等)还是大分子(如蛋白质等)拿期苏阶难均钢假个已被应用于各种印迹技术中 。

　　3.固相萃取

　　通常，样品的乎之小制备都包括溶剂萃取，由于分子印迹技术的出现，这可以用固相萃取代替，并且可利用分子印迹聚合物选择性富集目标分析物。由于印迹聚合物既可在有机溶剂中使用，又可路北常去在水溶液中使用，故与其他萃取过程相比，具有独特的优点。

　　4.天然抗体模拟

　　MIPS与印迹分子之间作用的强度与选择性在一定程度上可以和抗原与抗体之间的作用相媲美，因而可用于抗体模矿字略烧国准数值拟,这种模拟抗体制备简单、成本低，在高温、酸碱及有机溶剂中具有较好的稳定性，此刘宪行频按判林分外还可以重复使用。

　　5.模拟酶催化

　　例如以吡哆醛为印迹分子，用4一乙基咔哇为单体制备出分子印迹高聚物，它促进了氨基酸衍生物的质子转移。

　　6.控致房致报着早丰急抓结缓释药物

　　印迹高聚物可以吸收大量与印迹分子结构相似的物质，可以被用来作为一种反应性控制释放载体。