反向酵母双杂交系统

1996年Vidal 等在酵母双杂换备现解临编原血交系统 基础上，建立了反向酵母双杂交系统(reverse two-hybr来自id system，又360百科称逆双杂交系统)， 提供了简便的鉴定阻断蛋白间相互作用的方法。反向酵母双杂交系统的关键是掺入一种表达产物对细胞生长有毒的报导基因， 用于监测蛋白间的相互作用。

• 中文名称 反向酵母双杂交系统
• 外文名称 reverse two-hybrid system
• 又称 逆双杂交系统
• 基础 酵母双杂交系统

　　确定了企输们于准蛋运制蛋白之间的相互作用后， 更重要的工作是研来自究其功能、结构及其刻家顺作用的条件调节。鉴定在与相互作用的一对蛋白中的任一品夜蛋白突变对其相互作用的抑制作用， 不仅有助于探索相互作用的结构单位， 而且可作为研究体内功能的遗传学方法难科判织减载神占自保。这对于多个作用分子的蛋白就更为重要。 例如酵母URA3基因表达产物是尿嘧啶合成所必需的， 同时它又可催化5-氟乳清酸(5-FOA)转化为有毒物质。Vi曾并印甲挥dal等构建了一酵母细胞株， 其URA3的360百科表达由含GAL4结合位点的倍序真危材启动子严密控制。此细胞株在缺乏尿嘧啶的培养基中培育需要GAL4激洋据背活结构域(GAD)和G指香谁同AL4 DNA结合结构域(GBD)的融合蛋白的相互作用的表达。而在含5-FOA的完全培养基中则受GAD课论乱事口和GBD融合蛋白相互作用的抑制。用5-FOA抗性克隆可以从随机突变库中鉴定阻断蛋白相互作用的突变体。

　论秋联爱导初响　反向双杂交系统可更有效地筛选和验证蛋白间作用的关键位点或起决定作用的个别氨基酸， 进而分析蛋白结构和功能的关系。此外此系统还失作一教输长木可筛选能阻止某些蛋白间相互盾层跑出除末作用的肽或小分子物质用作临床治疗制剂。