副溶血性弧菌

副溶血性弧菌(Vibrio Parahemolyticus)，为革兰氏阴性杆菌，呈弧状、杆状、丝状等多种形状，无牙孢。

进食含有该菌的食物可致食物中毒，也称嗜盐菌食物族举能祖实预帮室中毒。临床上以急性起病、腹痛、呕吐、腹泻及水样便为主要症状。副溶血性弧菌是一种海洋细菌，主要来源于鱼、虾、蟹、贝类和海藻等海产品。此菌对酸敏感，在普通食醋中5分钟即可杀死;对热的抵抗力较弱。

• 中文名 副溶血性弧菌
• 外文名 Vibrio Parahemolyticus
• 类型 细菌
• 隶属 海洋细菌

基本概述

　　副溶血弧菌是革兰氏阴性多形态杆菌或稍弯曲弧菌。本菌嗜盐畏酸，在无盐培养基上，不能生长，3%～6%食盐水繁殖迅速，每8～9分钟为1周期，低于0.5%来自或高于8%盐水中停止生长。在食醋中1～3分钟即死亡，加热56℃5～10分钟灭活，在1%盐酸中5分钟死亡。

360百科　　已知副溶血弧菌有12种O抗原及5么件9种K抗原，据其发酵糖类的情况可分为5个类型。各种弧菌对人和动物均有较强的毒力蛋血，其致病物质主要有分子量42000的致热性溶血素（TDH）和分子量48000的TDH类似溶血毒（TRH），清映干评说预名具有溶血活性、肠毒养思神吗头帝语西车素和致死作用。

副溶血性弧菌

　　在副溶血弧菌食物中毒的流行季节，根据进食可疑食获沉给才古纸右物（腌渍品、海产品）、集体发病、潜伏期短视台似口回承波打动千及而起病急骤、发热和腹痛均较其他肠道传染病为严重、腹泻物呈血水样、失水多见等特点，临床诊断即可成立，对可疑食物进行培养，有时可分离出和粪便中相同的副溶血弧菌。本病应与葡萄球菌性食物中毒、产肠毒素性大肠杆菌类食物中毒、沙门氏菌食物中毒、急性菌痢和霍乱等鉴别。 进食被副溶血性弧菌污染的食物后阳坐色造10小时左右出现上腹部阵发性绞州笑娘燃减已至雷抓实支痛、腹泻，多数患者在腹泻后出现恶心、呕吐，腹泻多为水样及洲宣便，重者为黏液便和黏血便。呕吐、腹泻严重，失水过多者可引起虚脱并伴有血压下降。大部分病人发病后2~3天恢复正常，少数严重病人由于休克、昏迷而死亡绿周止。

发现过程

　　1950年，以日本大阪府为中心的泉州地方，发生了第二次世界大战以来最严重的集体食物中毒事件。患者出现剧烈腹痛及下痢的症状，原因不明。最后统计共有272名患者中毒，其中有20名死亡。发病的患者全部都食用了大阪府的行商所贩卖的青鱼干，因此当局立刻对这批鱼活江使脚圆选促觉曲营干进行分析。然而，在鱼干中并未发现任何已知会导致食物中毒的作跟土国火运剂细菌。因此，当局怀疑有人刻意将毒物混入鱼干中，将这个事件作为刑事案件调查。

　　由于前一年的1949年才刚发生了并称为“日本国铁三大谜案”的松川事件、下山事件及三鹰事件，在这样的背景下，导致了民众的恐慌矛家每场未项京。有人认为，这起集体食物中毒事可星若内农选杨步件是为了使社会混乱而进行的下毒。然而，在鱼干中促住现费落命并未化验出包括砒霜、亚硝酸盐等任何有毒化学物质，事件的原因仍然不明。

　　对此，大阪大学的藤原恒三郎教授从未知感染菌的角度进行了分析。他使用洋菜培养基培养菌种，并进行动们践物实验，最后终于再台流专从鱼干样品中分离了一种新种细菌，即肠炎弧菌，找出了食物中毒的原因。由于这种新种细菌是日本人发现的，在当时的日本医学界掀起了一阵波澜。当时大多数的日本学者对病菌的概念，都还停留在19世纪的老旧观念；肠炎弧菌的发现震撼了他们。发现者藤原教授用“粗大且笔直，不断的活动点月已经田”（日文：ふとっちょで真っ直ぐで、よく動き回る）来形容这种细菌的外型。此种病菌与当时弧菌属的代表霍乱弧菌外型差异甚大，因此藤原认为此菌应归类为巴斯德菌属，在1951年将其命名为Pasteurellaparahaemolyticus并发表。

　　1955年，日本国立横滨医院的医师滝川巖在腌渍物中发现了食物中毒的病原菌，后来证明与大阪中毒事件的病原菌是相同的。同时，他也发现了这种细菌是嗜盐性的，因此，将此菌的日文名称定为病原性好盐菌（日文：病原性好塩菌）。

　　1960年，日本东京及千叶县一带发生了多起因食用竹荚鱼而导致食物中毒的事件，检验后发现病原菌是肠炎弧菌，引起了医学界的注意。对此，厚生省(今厚生劳动省，日本中央政府的卫生主管单位)将肠炎弧菌列为引起食物中毒的重要病原菌之一，进行相关研究。

　　1963年，日本国立预防卫生研究所（今日本国立传染病研究所）的福见秀雄和坂崎利一证明了此种细菌应属于弧菌属，将学名改定为Vibrioparahaemolyticus，同时也将此种细菌的日文名称改为肠炎弧菌（日文：腸炎ビブリオ），沿用至今。

性状

　　01248577132707558843425_s.png">弧菌属细来自菌的型态比较 左：霍乱各职征兰弧菌的模式图，有弧菌的典型特征：逗点状的杆菌本体及粗的单毛性鞭毛(端鞭毛)。 右：肠炎弧菌的形式图，细菌本体的形状是笔直的棒状，除了端鞭毛外，还有360百科许多细的侧鞭毛。 肠炎弧菌和霍乱弧菌、创伤弧菌等细菌，都是弧菌科弧菌属的成员。但是，肠炎弧菌和其他弧菌在一些特针反夫参建那静征上，有着相当的不同。肠炎弧菌的长度约是0.3与信练土所套×2µm，其细菌本体不像典型弧菌的弯曲状，反而是笔直的棒状（类似杆菌）。此外，肠炎弧菌不能使乳糖及蔗糖发酵，与可以发酵葡萄糖及蔗糖的其他弧菌科细菌不同，这也是区别肠炎弧菌与其他弧菌的方法之一。由于这个特性，肠炎弧菌在TCBS培养基上呈现亮绿色，与一般弧菌的黄色不同。

弧菌属细菌的型态比较 左：霍乱弧菌的模式图，有弧菌的典型特征殖：逗点状的杆菌本体及粗的单毛性鞭毛(端鞭毛)。 右：肠炎弧菌的形式图，细菌本体的形状是笔直的棒状，著审供血及式奏万除了端鞭毛外，还声翻掌有许多细的侧鞭毛。

　　肠功建积家液你待山炎弧菌对酸碱改变敏感，适合生长的pH值约在7.5-8之间，可耐受的酸碱值为pH5-11。肠炎弧菌与霍乱弧菌相同，都喜欢偏碱性的环境，但是与霍乱弧菌不同的是，肠炎弧菌必须要在环境有氯化钠存在的条件下才能增殖（但是如果使用血液洋菜胶培养基时则不需要添加氯化钠）。适合肠炎弧菌生长的盐度约在2-3%，超过10%或低于0.5%均不能增殖。

　　适合肠炎弧菌生长的温度约在20℃以上，温度在15℃以下时，生长会受到抑承测否围可制。肠炎弧菌对热的耐受力相当低，使用一般的高温灭菌法即可完成杀菌。因此，因肠炎弧菌而造成食物中毒的患者，通常是肇因于食用未经煮熟的海产。此外，肠炎弧菌菌株在低温时也容易死亡。肠炎弧菌不耐干燥(aw=0.948时无法生长)，在干燥环境中会迅速死亡。

　　肠炎弧菌的增殖速度很快，在含3%氯化钠的脑心浸出物培养液中，只要8分钟左右就会分裂一次。而该菌在海产中的繁殖也相当迅速，例如：30℃时，肠炎弧菌在章鱼中从102CFU/g繁殖到107CFU/g仅需六小时。肠炎弧菌的增殖迅速是造成食物中毒的一大原因。

　　肠炎弧菌拥有一大一小的两个染色体(分别有3.2×106和1.9×106个碱基对)，是人类首次发现拥有复数染色体的细菌品种。

生物学特性

1形态染色

　　革兰阴性菌，随培养基不同菌体形态差异较大，有卵圆形、棒状、球杆状、梨状、弧形等多种形态。两极浓染。菌体一端有单鞭毛，运动活泼。无芽胞、无荚膜。

2培养特性

　　需氧，营养要求不高，在普通助次培养基中加入适量Na每区非Cl即能生长。NaCl最适浓间且席油会医搞度为35g／L，在无盐培养基中不生长。本菌不耐热，不耐冷，不耐酸，对常用消毒剂抵抗力弱。生长所需pH为7.0～9.5，最适pH为7.7.

　　在液体培养基表煤笑蒸福革吃表极乐面形成菌膜。

　　在35g／LNaCl琼脂平板补门益上呈蔓延生长，菌落边针门身广促缘不整齐，凸起、光滑湿润，不透明；

　　在副溶血性取结亲政采题弧菌专用选择培养基上形成1～2.5mm，稍隆起、混浊、无粘性、绿色菌落；

　　在SS平板上不生长或长出1～2mm扁平无色半透明的菌落，不易挑起，挑起时呈粘丝状医学教`育网搜集整理。

　　在羊血琼脂平板上，形成2～3mm、圆形、隆起、湿润、灰白色菌落，某些菌株可形成β溶血或α溶血。

　　在TCBS琼脂上不发酵蔗糖，菌落绿色。（与霍乱弧菌相区别）

​3生化唱反应

　　本菌在30g／LNaCl和70g／LNaCl培养基中生长，在无盐或100g／LNaCl培养基中不生长。神奈川试验是致病菌株能使人或兔红细胞发生溶血，对马红细胞不溶血，称神奈川试验阳性。

微生物学检验

1标本采集

　　主要是患者的粪便、可疑食物、炊事用具的洗涤液等医学教育网搜集整理。

2检验方法及鉴定

　　（1）增菌培养：取标本0.5～1ml接种40g突影国那独些／LNaCl蛋白胨水中，37℃培养，若有本菌存在，一般数小鲜学快基钟输突零时即出现明显混浊，即可分离培养.

　　②分离培养：将标本或增菌培养物接种副溶血弧菌选择培养基35℃培养18～24h观察结果。菌落湿润、混浊无粘性，呈绿色；

　　③鉴定：根据其形态、染色、多形性、活泼动力等特点，以及在选择培养基上的菌落特征，结合氧化酶试验阳性，在KIA上K/A，H2S（-）。在MIU上“++-”。以及嗜盐试验和血清学分型可作初步鉴定。

　　最后鉴定，必要时作进一步生化试验及毒力试验。

3临床意义

　　致病因子有粘附因子（主要为菌毛）、毒素（如耐热性溶血素）。

　　所致疾病为食物中毒及急性胃肠炎，常为被污染的海产品及盐腌制品所引起，此菌尚可引起浅表创伤感染、败血症等。

4治疗原则

　　选用合适的抗生素及其他抗菌药物，严重病例需输液及补充电解质。

中毒预防

副溶血性弧菌

　　加工海产品的案板上副溶血弧菌的检出率为87.9%。因此，对加工海产品的器具必须严格清洗、消毒。海产品一定要烧熟煮透，加工过程中生熟用具要分开。烹调和调制海产品拼盘时可加适量食醋。食品烧熟至食用的放置时间不要超过4个小时。主要病理变化为空肠及回肠有轻度糜烂，胃粘膜炎、内脏（肝、脾、肺）淤血等。 辅助检查：

　　1、白细胞计数总数多在1万mm3以上，中性粒细胞偏高。

　　2、便检查镜检可见白细胞或脓细胞，常伴有红细胞，易被误诊为菌痢。粪便培养可检出副溶血弧菌，绝大多数迅速转阴，仅少数持续阳性2～4天。

治疗措施

副溶血性弧菌

　　1、支持及对症治疗脱不者需输入生理盐水及葡萄盐水，或口服补液盐，以纠正失水。血压下降者，除被补充知容量，纠正酸中毒等外，可酌用血管活性药。

　　2、抗菌药物轻者患者可不用抗菌药物，较重者可给复方新诺明或庆大霉素、阿米卡星和诺氟沙星等喹诺酮类抗菌药物。

　　3、发生中毒后要立即停止食用可疑中毒食品，并到医院医治。副溶血性弧菌对氯霉素敏感。呕吐、腹泻严重者要补充水和盐。

发病机理

副溶血性弧菌

　　吞服10万个以上活菌即可发病，个别可呈败血症表现。该菌有侵袭作用，其产生的TDH和TRH的抗原性和免疫性相似，皆有溶血活性和肠毒素作用，可引致肠袢肿胀、充血和肠液潴留，引起腹泻。 TDH对心脏有特异性心脏毒，可引起心房纤维性颤动、期前收缩或心肌损害。最近有人发现脲酶与本病腹泻有关。患者体质、免疫力不同，临床表现轻重不一，呈多型性。山区、内陆居民去沿海地区而感染者病情较重，临床表现典型；沿海地区发病者病情一般较轻。

流行病学

副溶血性弧菌

　　1、传染源传染源为病人，集体发病时往往仅少数病情严重者住院，而多数未住院者可能成为传染源，但由于病人仅在疾病初期排菌较多，其后排菌迅速减少，故不至因病人散布病菌而造成广泛流行。 2、传播途径本病经食物传播，主要的食物是海产品或盐腌渍品，常见者为蟹类、乌贼、海蜇、鱼、黄泥螺等，其次为蛋品、肉类或蔬菜。进食肉类或蔬菜而致病者，多因食物容器或砧板污染所引起。

　　3、易感者男女老幼均可患病，但以青壮年为多，病后免疫力不强，可重复感染。本病多发生于夏秋沿海地区，常造成集体发病。近年来沿海地区发病有增多的趋势。

临床表现

　　潜伏期自1小时至4天不等，多数为10小时左右。起病急骤，常有腹痛、腹泻、呕吐、失水、畏寒及发热。腹痛多呈陈发性绞痛，常位于上腹部、脐周或回盲部。腹泻每日3～20余次不等，大便性状多样，多数为黄水样或黄糊便。2%～16%呈典型的血水或洗肉水样便，部分病人的粪便可为脓血样或粘液血样，但很少有里急后重。 由于吐泻，患者常有失水现象，重度失水者可伴声哑和肌痉挛，个别病人血压下降、面色苍白或发绀以至意识不清。发热一般不如菌痢严重，但失水则较菌痢多见。近年来国内报道的副溶血弧菌食物中毒，临床表现不一，可呈典型、胃肠炎型、菌痢型、中毒性休克型或少见的慢性肠炎型。本病病程自1～6日不等，可自限，一般恢复较快。

PCR检测

　　用于检测该菌的PCR方法主要有任意引物PCR(abritrarilyprimedPCR，Ap-PCR)、针对任意引物PCR、多重PCR(muhiplex-PCR)、实时PCR(Real-timePCR)。 1、任意引物PCRMatsumoto等采用任意引物PCR对副溶血性弧菌进行检测。针对该菌的tdh基因和trh基因一段特异的序列，设计两条引物，

　　引物1：5’--GGTGCGGGAA--3’

　　引物2：5’一GTTTCGCTCC一3’

　　对1977～1998年所收集的227株副溶血性弧菌进行PCR。通过电泳分析发现，1996~1998年收集的22株血清型为03：K6菌株与1996年以前收集的03：K6血清型菌株基因序列有所不同，为03；K6血清型新出现的变异株，并最初出现在孟加拉国。这是目前最简单的以基因为基础的细菌亚分型方法。

　　2、针对任意引物PCR由于临床分离株绝大多数含有tdh基因，因此绝大部分研究者都根据tdh设计引物进行特异扩增。1993年，Lee等根据tdh基因设计引物，对36株TDH+株、89株TDH-株以及46株其他弧菌和肠道菌进行PCR检测。结果显示，36株TDH+株全部特异扩增出来，其余菌株都没有扩增；而检测灵敏度高，最低检测量可至40pg DNA，并可直接检测粪便标本，无需分离培养，方便快速。1999年，Kim等选择toxR基因序列设计两对引物，5’--GTCTTCTGACGCAATCGTTG--3’和5’一ATACGAGTGGTTGCTGTCATG一3’，对14株副溶血性弧菌、14株其他弧菌进行PCR。结果显示，14株副溶血性弧菌都得到一条368bp的特异扩增亮带，而其他菌株没有特异扩增。此外，Venkateswaran等选择gyrB基因设计引物对副溶血性弧菌进行PCR、Cordova等选择pR72H基因设计引物进行PCR，特异性、灵敏度都很好。

　　3、多重PCR由于不是全部副溶血性弧菌都含tdh基因或trh基因，所以只针对tdh或trh的单一PCR，有时会漏检。多重PCR能全方位高效率地检测该菌。1994年研究人员等针对tdh、trh设计不同的引物对，在同一PCR反应体系内同时扩增tl、tdh、trh。结果显示，所有的副溶血性弧菌都扩增出tl基因，tl基因是该菌特异的；54％的副溶血性弧菌扩增出tdh基因；只有38．73％的副溶血性弧菌扩增出trh基因；该法灵敏度很高。与其他常规生化方法相比，多重PCR更快速，仅8h就能完成检测，结果更为准确、可靠，而且还可改进成定量竞争PCR，对标本中靶序列进行定量。

　　4、实时PCR常规PCR检测，需要从反应体系中吸取产物做电泳或Southern杂交等试验进行鉴定，转移过程中易污染，造成假阳性，而且耗费时间。1996年，Tyagi开创了一种实时PCR(Real-time PCR)。实时PCR是在PCR反应体系中加入标记有报告基团和淬灭基团的线性Taqman探针或茎环型荧光分子信标探针，在基因扩增过程中，与产物杂交，此时，报告基团和淬灭基团分开，根据能量共振转移现象，报告基团发出荧光而被检测。这种方法操作简单，闭管检测，减少污染，灵敏度高，并且可以在PCR结束或PCR过程进行同步定性或定量检测，面且可以进行临床大规模快速检测。